澳門大橋將於10月1日（周二）下午2時起通車，車輛屆時可經澳門大橋的多個出入口往返新城A區、港珠澳大橋澳門口岸管理區（下稱“人工島”）及氹仔北安一帶。澳門大橋啟用後，由路氹往返人工島的交通路徑預計由友誼大橋轉移至澳門大橋，新路徑較經友誼大橋縮短約3公里，行車時間節省約3至6分鐘，亦會分擔友誼大橋高峰時段約三成車流。

澳門大橋設有電單車專道，汽車及電單車進出大橋的位置請參閱附表一及相關示意圖︰

附表一︰澳門大橋出入口位置

為理順澳門大橋開通後的車流交織情況、分流前往不同目的地之車輛，以及保障交通安全，E區內部份道路早前亦已調整行車安排；偉龍馬路行車天橋和北安大馬路新增的5組交通訊號燈亦會配合澳門大橋開通投入運作。另外，設於北安大馬路上的兩個調頭處行車安排亦會有所調整，其中，近友誼大橋一側的調頭處僅供來自偉龍馬路行車天橋的車輛使用，以前往澳門大橋電單車專道或新城E區，同時，為理順行車秩序，該調頭處禁止來自北安圓形地方向的車輛使用，相關車輛可取道早前於偉龍馬路行車天橋下方新增的調頭處。

另一方面，交通事務局已分別協調兩巴和博企相關路線行經澳門大橋，以便乘客更快捷往返人工島和離島各處，增設103X巴士路線直接往返港珠澳大橋邊檢大樓與氹仔客運碼頭（詳見附表二），便利乘客轉乘輕軌。而由人工島往來北安或路氹之酒店及娛樂場穿梭巴士路線則會改經澳門大橋。

附表二︰103X巴士路線安排

交通事務局已在澳門大橋安裝多個視頻監測設備，以監控橋上交通狀況及駕駛行為，並在相關路段設置多組大型提示牌，指引駕駛者前往各目的地，同時呼籲駕駛者留意路面環境，注意車速，切勿違法駕駛。局方會密切留意澳門大橋的交通情況，持續完善大橋兩端出入口及周邊道路的交通安排，適時調整。